定向同步电生理记录
T* 及其主要下游听觉区同步多通道记录，模型 tFUS / 模型假刺激 / 盐水 tFUS / 盐水假刺激各 5 只（20 只，独立于疗效队列）。声音、静音、超声、行为事件 TTL 同步。
采集单单位放电（spikes）、多单位活动（MUA）、局部场电位（LFP）。主要神经指标 = 静音时段动物层面平均自发放电率；次要 = 声音诱发增益、声音—静音群体判别表现。群体分类用按记录时段分块的嵌套交叉验证，标准化与特征选择仅在训练部分完成，动物层面汇总评价泛化。
若 T* 为 MGB，则重点记录 MGB 与初级听觉皮层 A1，分析静音异常活动及声音编码变化。
投射示踪与细胞类型鉴定
以 MGB 为 T* 时，优先考察投射至 A1 的 MGB 神经元：A1 注射逆行示踪载体，MGB 内报告标记识别投射来源，必要时顺行示踪确认终末分布。RNAscope / 免疫共标记检测 Slc17a6（兴奋性）与 Gad1/Gad2（抑制性），量化报告阳性细胞的类型比例、靶区覆盖、离靶表达。
环路必要性实验（反向 DREADD）
用 DREADD 实施与 tFUS 主要神经效应方向相反的可逆操作：tFUS 降低增强的自发活动 → 用兴奋性 hM3Dq 恢复；tFUS 增强低反应状态 → 用抑制性 hM4Di 限制。方向根据独立神经表征在实验前固定。
2×2 设计（tFUS/假刺激 × 反向 DREADD/对照载体），每组 8 只共 32 只；另设效应载体加溶剂组各 3 只核查操作效应。主要检验 = tFUS 与环路操作的交互作用。第 5～9 天每次 tFUS 期间实施反向 DREADD，第 10 天测 p静音（不追加配体）。
必要性证据要求：对照载体条件下有可重复 tFUS 行为效应，反向操作确实抵消主要神经变化，且行为获益随之减弱。
环路同向模拟（条件性补充）
独立疗效方向稳定、重点神经指标可重复、反向操作验证合格时，开展无超声条件下的同向 DREADD：效应载体+配体 / 效应载体+溶剂 / 对照载体+配体 / 对照载体+溶剂，每组 6 只共 24 只。
分子表达分析
围绕 GABA 能传递、谷氨酸受体、突触可塑性选 3～5 项候选分子（Gad1/Gad2、Slc17a6、Grin1、Gria2、Bdnf），用四组相容组织做 RNAscope 及免疫荧光，比较表达水平与细胞分布，按动物汇总并分析与自发放电、声音编码、第 10 天 p静音 的关系。图像采集与定量盲法，预设切片间距、区域数量、背景阈值、共定位判据。
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