tfus-tinnitus：研究二：耳鸣样小鼠模型与tFUS剂量及疗效

动物与耳鸣样模型

8～12 周龄 CBA/CaJ 小鼠，雌雄均衡。模型先导用水杨酸钠 250 mg/kg 腹腔注射、每日一次、连续 14 天，等体积生理盐水对照。模型是否适用依据操作性行为、听觉功能及一般状态共同判定。

给药第 3、4 天确认耳鸣样状态，第 5～9 天干预，第 10 天测主要终点。

声音—静音操作任务（主要行为学）

双选择声音—静音判断任务，有声与静音试次分别强化正确选择。主要指标 p静音 = 静音试次选「有声」次数 ÷ 有效静音试次数。

训练达标：连续 3 天总正确率 ≥80%、静音误报率 ≤20%，每日 ≥100 有效试次且含 ≥40 静音试次。耳鸣样入组标准：给药第 3、4 天 p静音较个体基线增加 ≥20 个百分点，且有声命中率 ≥70%、遗漏率 ≤20%。

支持性听觉测量

GPIAS / PPI：抑制率 = [1 − 有间隙(前脉冲)惊跳幅度 / 无间隙惊跳幅度] × 100%。ABR 在基线、模型确认、主要终点后及恢复期测量；DPOAE 评价耳蜗外毛细胞功能。GPIAS 异常或单项 ABR 变化均不单独用于判定耳鸣。

声场标定与参数优化（27 组合）

工程起始载频 1.0 MHz；靶区峰值负压（PNP）0.15/0.30/0.45 MPa，脉冲长度（PD）0.2/0.6/1.0 ms，脉冲重复频率（PRF）100/300/500 Hz，构成 3×3×3 = 27 种组合；占空比按 PD×PRF = 2%～50%。每种组合测量三维 −6 dB 焦域、焦点偏移、旁瓣、颅骨透射。

起始时间结构：1 s 脉冲串、串间 9 s、共 30 串，总流程 300 s、累计 30 s。按暴露由低到高选 3 项代表方案做动物功能先导（12 只，每方案 4 只，每只仅一项方案）。

独立随机疗效评价

52 只可评价动物：模型靶向 tFUS 12、模型假刺激 12、模型离靶 tFUS 8、模型匹配声音 8、盐水靶向 tFUS 6、盐水假刺激 6。主比较 = 模型靶向 tFUS vs 模型假刺激。

第 1～14 天每日给药；第 5～9 天给药后约 2 h 实施 tFUS，每日 1 次共 5 次；第 10 天给药后约 3 h 测主要行为（距末次声照约 25 h）；第 14 天评持续给药下行为，第 17、28 天停药恢复轨迹。分层区组随机（性别、模型确认时 p静音、听阈、批次），干预与评价分工，盲法。

主要分析：二项广义线性混合模型，结局为第 10 天静音选择，纳入分组、模型确认时 p静音、性别、批次，动物随机截距；过度离散用 beta-binomial。报告组间边际概率差及 95% CI，主比较 α=0.05。